CD22 设门流式细胞术检测 CD19 CAR-T 治疗后复发 B-ALL，更具成本效益

2020 年新冠疫情全球肆虐，但疫情并未阻挡血液界对学术研究、临床实践的不断探索与交流。2020 年 12 月 5-8 日，第 62 届美国血液学会年会（ASH 2020）首次以线上形式召开。作为全球血液学领域最大最权威的国际学术盛会之一，ASH 每年都会吸引来自全球 100 多个国家的近三万名血液学专家、学者和其他相关医疗保健专业人士参会，会议期间将有超过数千多份摘要呈现。

近年来，CAR T 细胞治疗恶性血液肿瘤取得的成功引起人们对免疫治疗领域的极大兴趣。流式细胞术 (FCM) 是检测 CAR-T 细胞治疗后肿瘤细胞残留情况的最重要的方法之一。

在 FCM 分析中，CD19 一直是 B 细胞设门的经典标记。然而，复发/难治 B 细胞急性淋巴细胞白血病（B-ALL）病例接受 CD19 CAR-T 细胞治疗后，B 细胞 CD19 的表达丢失使得 CD19 设门法不再适用于流式分析。在这种情况下，通常会采用胞浆 CD79a（cCD79a）代替 CD19 作为 B 细胞设门标记。

然而，cCD79 是胞内染色，比较费时，有时会有非特异性染色，还可能因破膜和洗涤步骤造成细胞丢失以致没有足够的细胞进行分析。CD22 是另外一个泛 B 标记，也可能成为 CD19 CAR-T 治疗后 B 细胞设门的一种选择。本次 ASH 大会上，高博医学诊断中心流式细胞实验室喻新建主任报告了团队比较 CD22 和 cCD79a 在 CD19 阴性复发 B-ALL 患者中的表达，评估 CD22 作为 CAR-T 治疗后 B 细胞设门标记可能性的研究数据。 

研究共纳入 40 例 CD19-CART 治疗后 CD19 阴性复发的 B-ALL 患者，包括 14 例成人和 26 例 18 岁以下儿童，中位年龄 12 岁（范围 1～64 岁）。这些患者的骨髓标本均同时检测 cCD79a 和 CD22 的表达。标准 panel 由 CD45、CD19、CD22、CD10、CD20、CD34、CD38、CD58、cCD79a、CD81、HLA-DR 和 CD123 组成。根据患者初诊的免疫表型可添加额外抗体。 

检测结果显示，40 例患者（100%）B 细胞 cCD79a 为正常荧光强度表达。CD22 在所有病例中均见表达，其中 33 例（82.5%）为正常荧光强度表达，7 例（17.5%）为部分或弱表达（P/D）。

CD22 在 P/D 表达时不适合作为设门标记。为了弄清 CD22 P/D 表达是否与 CD19 CAR-T 治疗相关，研究回顾了该 7 例患者 CAR-T 治疗前的免疫表型，发现 4 例患者 CD22 为 P/D 表达，3 例患者 CD22 为正常强度表达。排除 4 例治疗前 CD22 P/D 表达的患者后，91.7%（33/36）的患者 CD22 和 cCD79a 表达一致，表明 CD22 在绝大多数情况下可作为 CD19 治疗后病例的 B 细胞设门标记。 

综上，我们的研究数据显示，在 82.5%～91.7% 的 CD19 CAR-T 治疗后复发病例，仅用 CD22 设门可有效识别 B 细胞。与 cCD79a 设门相比，CD22 设门不失为一种兼具成本效益且省时省力的常规检测策略。在 CD22 部分表达或弱表达的患者中，才需采用 cCD79a 设门。

参考文献

https://ash.confex.com/ash/2020/webprogram/Paper139437.html

封面图来源：站酷海洛

编辑： 海往南    来源：北京博仁医院